الف) مقدمه
بافر لیز RIPA (Radioimmunoprecipitation assay buffer) یک محلول کامل شامل دترجنت های یونی و غیر یونی است که قادر به لیز و محلولسازی طیف وسیعی از پروتئینها از انواع سلولهای چسبنده، سوسپانسیون و انواع بافتهای نرم جانوری میباشد. از آنجایی که اکثر پروتئین ها و آنتی بادی ها تحت تاثیر اجزای تشکیل دهنده این بافر قرار نمی گیرند، لذا به طور گسترده به عنوان بافر لیز و بافر شستشو درسنجشهای تمایلی pull down از جمله رسوبدهی ایمنی مورد استفاده قرار گرفته است. علاوه بر این، بافر لیز RIPA میانکنش های غیر اختصاصی بین پروتئین ها را به حداقل رسانده و با حفظ میانکنشهای اختصاصی، امکان مطالعه میانکنشهای پروتئین- پروتئین را فراهم می آورد. پروتئین های استخراج شده با بافر RIPA برای انواع روشهای الایزا، PAGE، SDS-PAGE، وسترن بلات، رسوبدهی ایمنی و سنجش آنزیمی سازگار است.
این بافر حاوی انواع مهارکنندههای پروتئازی و فسفاتازی می باشد. بافر RIPA حاضر بصورت 1X و آماده مصرف می باشد می باشد. اما برخی از مهار کننده های آن بصورت کوکتل 100X در کیت گنجانده شده است که قبل از مصرف 10 میکرولیتر از آن به یک میلی لیتر بافر افزوده شود.
توصیه می شود بافر ریپا و کوکتل قبل از فریز کردن در منهای بیست درجه سانتی گراد الیکوت شود.
.کاربردهای کیت: این بافر استخراج مناسب برای تهیه نمونه جهت وسترن بلات WB، ELISA ، SDS-PAGE، IP،Co-IP، تخلیص پروتئین و سنجش های آنزیمی میباشد.
ب) محتویات کیت
نگهداری کیت
بافر استخراج پروتئین بایستی در کمتر یا مساوی 20- درجه سانتیگراد نگهداری شود. این بافر به مدت 2-3 هفته در °C4 و به مدت شش ماه در °C20- پایدار است.بهتر است بافر الیکوت شده و از فریز و دفریز بافر به صورت مکرر خودداری گردد. در صورت نگهداری بافر در شرایط مناسب، بافر تا یکسال پایدار میباشد.
با کلیک بر روی دکمه مقابل میتوانید دستور العملهای مربوط به این محصول را مطالعه کنید مشاهده دستور العملها